一、产品简介

尊龙凯时推出的通用细胞冻存试剂盒（BA3309）专为各类哺乳动物原代细胞和传代细胞系的冻存保种而设计。该产品能够在复苏后有效维持细胞的存活率，且具有良好的储存稳定性，操作过程简便。产品组分包括通用细胞冻存液BA3309，提供100mL的容量。存储条件为-20℃，避光保存，有效期为两年。

二、注意事项

1. 使用离心机时，务必选用水平离心机，并设置合适的离心参数，以防止操作不当影响实验结果。
2. 本产品为无菌产品，请务必穿戴实验服及一次性手套，并严格遵循无菌操作，以避免微生物污染。
3. 使用前确保冻存液完全融化并混匀。
4. 争取在冻存前确保细胞状态良好。

三、自备材料

1. 仪器：水平离心机、细胞计数仪、-80℃冰箱。
2. 耗材：细胞冻存管、程序性冻存盒、低吸附枪头。

四、细胞复苏材料

1. 仪器：水平离心机、水浴锅。
2. 试剂：RPMI1640培养基。
3. 耗材：酒精棉球、低吸附枪头、离心管。

五、使用方法

1. 在使用前，将通用细胞冻存液完全融化并混匀。
2. 通过细胞计数仪计算总细胞数，冻存密度一般为1x10⁶/mL。
3. 将细胞离心沉淀，并弃去上清，保留细胞沉淀。不同细胞类型的离心条件可能略有不同，例如，人PBMC细胞的离心条件为300xg，5分钟。
4. 根据细胞数量计算所需冻存液体积，用移液枪吸取冻存液，并轻轻吹打以重悬细胞。
5. 将细胞分装至细胞冻存管中并进行标记，注意须使用专门用于液氮冻存的细胞冻存管，避免使用普通离心管。
6. 将细胞冻存管放置于可逐步降低温度的装置中，如程序性冻存盒，再放入-80℃冰箱，确保降温速度约为1℃/min，24小时后可转移至液氮中保存。

六、细胞复苏步骤

1. 打开恒温水浴锅，设置为37℃，取一离心管加入5mL细胞培养基，在37℃水浴锅中加热约2-5分钟。
2. 取出冻存管，立即放入水浴锅中快速摇晃，使冻存液迅速融化。
3. 完全融化后，用酒精棉球擦洗冻存管外部，以降低污染机会。
4. 打开冻存管，将冻存液滴加至上述温浴好的培养基中，边滴加边摇晃，完成后放入水平离心机，在4℃下以300xg离心5分钟。
5. 弃去上清，加入适当体积的培养基重悬细胞。

作为专注于免疫学、细胞生物学和分子生物学等领域核心试剂产品的研发、生产与销售的高新企业，尊龙凯时致力于为客户提供优质的生物医疗解决方案。欢迎咨询我们，了解更多产品信息！