尊龙凯时推出的猪瘟病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法）是一款高效的工具，专门用于检测猪血清中的猪瘟病毒抗体。作为一种高度传染性的疾病，猪瘟由猪瘟病毒（Classical Swine Fever Virus，CSFV）引起，表现出显著的临床症状，包括高热、广泛出血和组织坏死等。因此，准确评估猪只的免疫状况显得尤为重要。

产品名称与包装规格

产品的通用名为猪瘟病毒抗体检测试剂盒（酶联免疫法），英文名称为Test Kit for Antibodies to Classical Swine Fever Virus (ELISA)。其包装规格包括96T×1/盒、96T×2/盒、以及96T×5/盒。

预期用途

此试剂盒主要用于检测猪血清中的猪瘟病毒抗体，以帮助评估猪瘟病毒疫苗的免疫效果，确保养殖过程中的动物健康。

原理

尊龙凯时的试剂盒采用酶联免疫法（ELISA）的原理。试剂包括预包被猪瘟病毒重组E2蛋白的酶标板、酶标记物及其他配套试剂。在实验中，将对照血清和待检样本加入酶标板中进行温育。如果样品中含有猪瘟病毒抗体，则会与板上的抗原结合。经过洗涤去除未结合成分后，添加酶标记物和底物液，最终通过酶标仪测定各反应孔中的吸光值，以判断样品中是否含有猪瘟病毒抗体。

储存及有效期

本试剂盒应储存在2～8℃的环境中，有效期为12个月。开封后的包被板需要在2～8℃避光保存，避免受潮，使用期限为2个月。

适用仪器

适用于含有450nm、630nm波长的酶标仪，以及37℃恒温设备和可调微量移液器。

样品准备

1. 按常规方法制备动物全血，要求血清清亮，无溶血、无污染。样品可在2～8℃下保存一周，长期需置于-20℃保存。
2. 用样品稀释液将待检血清按40倍稀释（如5μl血清加入195μl样品稀释液中，混匀）。阴性和阳性对照不需稀释。
3. 使用前，浓缩洗涤液需恢复至室温并用蒸馏水或去离子水20倍稀释成工作洗涤液。

检验方法

1. 使用前将试剂盒在室温下放置30分钟。
2. 取必要量的酶标板条，设定阴性和阳性对照各2孔，未用的板条应密封保存于2～8℃。
3. 在阴、阳性对照孔中各加入100μl对照液；在样品孔中加入稀释后的样品100μl。
4. 混匀后加盖板膜，置于37℃条件下避光反应30分钟。
5. 洗涤孔内液体，加入工作洗涤液350μl，静置30秒后弃去，重复洗涤5次，最后一次拍干。
6. 每孔加入酶标记物100μl，盖好膜，再置于37℃避光反应30分钟。
7. 洗涤步骤与前项相同。
8. 依次在每孔中加入底物液A和底物液B各50μl，混匀后盖好膜，反应10分钟。
9. 添加终止液50μl，混匀后在450nm（可用630nm作为参比波长）测定各孔的吸光值。

参考值

实验正常条件下，阴性对照的平均OD值应≤0.3，而阳性对照的平均OD值应≥0.6。

检验结果的判定

1. 记录样品的OD值为ODS；
2. 计算阈值：SP值=（ODS-ODNC）/（ODPC-ODNC）；SP值≥0.2，结果判定为阳性；SP值＜0.2，结果判定为阴性。
3. 若结果为阴性，则表示猪只抗体水平不足，建议补打相应疫苗。

试验方法的局限性

该试验仅用于定性检测猪血清或血浆中的猪瘟病毒抗体，依据SP值高低可对抗体水平进行粗略评估。

注意事项

1. 实验操作需穿戴手套和工作衣，严格执行消毒隔离制度，废弃物按传染物处理。
2. 终止液具有腐蚀性，避免与皮肤和衣物接触，接触后需用大量自来水冲洗。
3. 酶标板应在恢复至室温后开袋，未用完的板需放入有干燥剂的密封袋中保存。
4. 在低温时容易结晶的浓缩洗涤液，使用前需恢复至室温以完全溶解。
5. 洗涤时确保各孔内液体加满，以清除孔口游离酶。
6. 检测所用样品应保证新鲜。
7. 实验结果的判定应以酶标仪读数为准。
8. 不同批号的试剂组分不得混用。